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    小鼠超氧化物歧化酶SOD試劑盒檢測范圍

    發(fā)布時間: 2016/3/4  點擊次數(shù): 762次
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    小鼠超氧化物歧化酶SOD試劑盒實驗原理:

       本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠超氧化物歧化酶(SOD)水平。用純化的抗- SOD抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入小鼠超氧化物歧化酶(SOD),再與HRP標記的羊抗鼠抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的小鼠超氧化物歧化酶呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠超氧化物歧化酶(SOD)濃度。

    小鼠超氧化物歧化酶SOD試劑盒樣本處理及要求:

    1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。

    2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

    3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

    4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

    5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

    6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

    7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

    檢測范圍:5U/L -200U/L                                         

    試劑盒保存:2-8℃

    小鼠超氧化物歧化酶SOD試劑盒有效期:6個月

    實驗目的:本試劑盒僅供實驗研究使用,用于測定小鼠血清,血漿及相關液體樣本中超氧化物歧化酶(SOD)的活性。

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